尺寸排阻色譜法是基于分子尺寸不同的分析物在化學惰性的多孔固定相的孔隙中保留作用的差異實現分離的一種色譜技術。
尺寸排阻法的分離特征:
1、樣品和填料不發(fā)生相互作用。
2、會否產生相互作用,取決于填料和樣品,以及流動相和填料的疏水性平衡。
3、按照分子大小從大到小的順序被洗脫。
4、比填料的最大孔徑大的樣品無法被分析。這個界限稱為排阻限,表示色譜柱能分析的樣品的大小上限。
5、排阻限所對應的色譜的洗脫容量被稱為填料粒子的外部容量。用符號 Vo表示。
6、色譜柱中填料的所有微孔的容量稱為填料粒子的內不容量。用符號Vi 表示。
尺寸排阻色譜柱為了方便根據待測成分的分子量來選擇合適的色譜柱,按照凝膠表面孔的大小分成了很多種類。各種色譜柱的排阻界限分子量在產品目錄上都有詳細記錄,使用的時候要按照待測樣品最大分子量不超過色譜柱的排除界限分子量的規(guī)則來進行選擇。另外,在不超過排除界限分子量的前提下,盡量選擇排除界限分子量小的色譜柱比較合適。