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Shim-Pack色譜柱清洗的溶劑選擇

更新時(shí)間:2021-08-25  |  點(diǎn)擊率:1406
  Shim-Pack色譜柱清洗的溶劑選擇:
  陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗,陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗,除去交換性能強(qiáng)的鹽,然后用水、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有機(jī)物)、甲醇、水依次沖洗。保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間。

  色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。在后兩種情況發(fā)生時(shí),小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,壓平,再擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善,但是很難恢復(fù)到新柱的水平。

  在選擇Shim-Pack色譜柱之前,需要先了解樣品和雜質(zhì)的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
  1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
  2. 如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,親水色譜,也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))
  3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱或一些經(jīng)過修飾的C18柱,他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留
  4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測或者選用HILIC色譜柱選擇強(qiáng)離子交換柱,也有使用強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
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