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島津高效液相色譜柱選擇的條件有哪幾點(diǎn)?

更新時(shí)間:2022-04-24  |  點(diǎn)擊率:1412
島津液相色譜柱按分析成分可分為反向色譜柱,HILIC色譜柱,正相色譜柱,離子交換色譜柱,制備液相色譜柱,毛細(xì)管液相色譜柱,聚合物基質(zhì)色譜柱,專用色譜柱等,島津液相色譜柱具有高惰性、高保留和低柱壓,性價(jià)比高。
 
島津高效液相色譜柱選擇的條件有哪幾點(diǎn)?
 
1、填料基質(zhì)
 
(1)硅膠基質(zhì):純度高本錢低,強(qiáng)度大,化學(xué)修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定,但經(jīng)過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。
(2)聚合物基質(zhì):應(yīng)用pH值范圍寬,溫度穩(wěn)定(高溫可以達(dá)到80度以上),機(jī)械強(qiáng)度小。
 
2、顆粒外形
 
大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒,但有時(shí)是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長(zhǎng)的島津高效液相色譜柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí);不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對(duì)低廉的價(jià)格。
 
3、顆粒粒徑
 
粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時(shí)會(huì)導(dǎo)致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
 
4、含碳量
 
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間,用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短、展現(xiàn)不同的選擇性,用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
 
5、孔徑和比表面積
 
HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒,盡大多數(shù)的反應(yīng)表面于孔內(nèi)。因此,分子必須進(jìn)進(jìn)孔內(nèi)才能被吸附和分離??讖胶捅缺砻娣e是相輔相成的兩個(gè)概念??讖叫”缺砻娣e大,反之亦然。島津高效液相色譜柱比表面積大,增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng),增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度;比表面積小,平衡時(shí)間快,適合梯度分析。
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