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制備液相保護(hù)柱的制備步驟和注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2024-10-23  |  點(diǎn)擊率:266
  制備液相保護(hù)柱是一個(gè)涉及多個(gè)步驟的精細(xì)過(guò)程,其主要目的是保護(hù)色譜柱,延長(zhǎng)其使用壽命,并確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。以下是制備液相保護(hù)柱的一般步驟和注意事項(xiàng):
 
  一、制備步驟
 
  1.材料選擇與準(zhǔn)備
 
  填料選擇:保護(hù)柱的填料應(yīng)與色譜柱的填料相匹配,以確保相似的分離性能和兼容性。常見(jiàn)的填料包括硅膠、氧化鋁、C18等。
 
  篩板準(zhǔn)備:保護(hù)柱柱芯的兩端各有一個(gè)篩板,用于過(guò)濾流動(dòng)相和樣品中的微粒污染物。篩板的孔徑應(yīng)小于色譜柱篩板的孔徑。
 
  2.柱體組裝
 
  將選定的填料裝入柱體中,確保填料均勻且緊密。
 
  在柱體的兩端安裝篩板,并固定好。
 
  3.預(yù)洗與平衡
 
  使用與后續(xù)實(shí)驗(yàn)相同的流動(dòng)相對(duì)保護(hù)柱進(jìn)行預(yù)洗,以去除柱子中的殘留物并穩(wěn)定柱子的性能。
 
  確保流動(dòng)相在保護(hù)柱內(nèi)達(dá)到吸附平衡,以提高分離效果。
 
  4.連接與測(cè)試
 
  將制備好的保護(hù)柱連接到色譜系統(tǒng)中,通常位于色譜柱之前。
 
  進(jìn)行系統(tǒng)測(cè)試,檢查保護(hù)柱的密封性、流速和分離效果等。
 
  二、注意事項(xiàng)
 
  1.填料選擇與色譜柱匹配
 
  保護(hù)柱的填料應(yīng)與色譜柱的填料相同或相似,以確保相似的分離性能和兼容性。
 
  2.篩板孔徑選擇
 
  篩板的孔徑應(yīng)小于色譜柱篩板的孔徑,以有效攔截可能堵塞色譜柱篩板的顆粒。
 
  3.流速控制
 
  避免超過(guò)保護(hù)柱的最大流速,以防止損壞柱子的填充材料并影響其壽命和分離效果。
 
  4.pH范圍控制
 
  使用符合保護(hù)柱pH范圍的溶劑和緩沖液,以避免破壞柱子的填充材料。
 
  5.樣品前處理
 
  在樣品進(jìn)入保護(hù)柱之前進(jìn)行前處理,如過(guò)濾、離心等,以去除樣品中的雜質(zhì)和顆粒。
 
  6.定期維護(hù)與更換
 
  定期對(duì)保護(hù)柱進(jìn)行物理清洗、沖洗以及檢查密封件等維護(hù)工作。
 
  當(dāng)保護(hù)柱的分離效果明顯下降時(shí),應(yīng)及時(shí)更換新的保護(hù)柱。
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